收藏已成功

进入会员中心返回网站首页

订单支付已成功

订单支付已成功，请继续浏览网页...

进入会员中心返回网站首页

投诉建议提交成功

感谢您提交的投诉和建议，我们会在24小时内回复您。非常感谢您的关注，请继续浏览网页……

进入会员中心返回网站首页

透景生命 / 新冠等分子检测 / 人K-RAS基因7种突变检测试剂盒（PCR荧光法）

人K-RAS基因7种突变检测试剂盒（PCR荧光法）

授权产品

kras突变检测，筛选肺癌、结直肠癌靶向用药人群

产品概述
性能参数
学术背景
常见问题
相关产品

产品概述

人K-RAS基因突变检测

人K-RAS基因7种突变检测试剂盒（PCR荧光法）

检测指标 :

人K-ras基因12、13位密码子上的常见突变

预期用途

检测人K-ras基因12、 13位密码子上的常见突变，用于辅助临床医生筛选出可受益于爱必妥（Cetuximab）和帕尼单抗（Panitumumab）等靶向药物的癌症患者。

适用机型

Roche LightCycler480Ⅱ、ABI7500 Real-time PCR detection system

样本要求

病理组织

产品规格

24人份/盒

保存条件及有效期

-20℃及以下避光冷冻存放，试剂盒有效期为9个月。

注册证号

国械注准20163401341

适用机型

实验室通用的实时荧光PCR平台

实验室常规荧光PCR技术，兼容不同种类检测

2小时总检测流程，小于0.5小时手工操作，灵敏特异、快速精确且自动化

推荐机型

Roche LightCycler480ⅡABI7500 Real-tie PCR detection syste

仪器设置：

① Roche LightCycler480Ⅱ，Detection Format：Dual Color Hydrolysis Probe/UPL Probe(FAM、VIC/HEX/Yellow555)，Reaction Volue：25ul； ② ABI 7500，Reporter Dye：FAM、VIC；Quencher Dye：NONE；Passive Reference：NONE；注：由于不同仪器的上的软件或软件版本不同，如需要选择实验模式，请选择绝对定量模式进行反应，并且所有孔位均定义为unknown。

指标意义

K-RAS突变—肺癌个性化治疗靶点

K-RAS：

是EGFR信号通路下游的一种小分子G蛋白，突变后抑制了自身的GTP酶活性，使得K-ras蛋白总是处于活化状态，导致信号通路不受上游EGFR信号指令的调控。研究表明, 结直肠癌患者中K-ras 基因的突变率约为35-40%, 90%的突变发生在12、13位密码子，其中约70%发生于第12位密码子, 30%发生于13位密码子。多项研究证实K-RAS基因突变状态与西妥昔单抗疗效相关，K-ras基因发生突变时西妥昔单抗治疗无效。

美国国家癌症综合网络(NCCN) 2009年版的临床指南4中明确指出：

KRAS突变使肺癌患者对EGFR-TKI和结直肠癌的抗EGFR抗体药物产生耐药，肿瘤患者接受EGFR靶向药物治疗之前，必须进行KRAS基因突变检测，根据检测结果决定是否使用EGFR靶向药物作为临床治疗措施。

密码子	12和13（耐药突变）
检测结果	突变	不突变
爱必妥、维克替比等单抗类药物	疗效差	疗效好

人K-ras基因12和13密码子上7种常见突变

Cosic ID	突变名称	碱基变化	氨基酸变化
521	Gly12Asp	GGT＞GAT	甘氨酸到天冬氨酸
520	Gly12Val	GGT＞GTT	甘氨酸到缬氨酸
517	Gly12Ser	GGT＞AGT	甘氨酸到丝氨酸
516	Gly12Cys	GGT＞TGT	甘氨酸到胱氨酸
522	Gly12Ala	GGT＞GCT	甘氨酸到丙氨酸
518	Gly12Arg	GGT＞CGT	甘氨酸到精氨酸
532	Gly13Asp	GGC＞GAC	甘氨酸到天冬氨酸

产品优势

通用的荧光PCR平台，快速准确成本低

通用的荧光PCR检测，成本低廉；
2小时即可完成整个实验，检测速度快；仪器自动判读结果，更加准确。

良好的灵敏度，避免漏检

检测灵敏度高，可检测出样本中低至１％的突变基因

全面覆盖靶向药物相关位点

检测位点全，涵盖了与靶向药物吉非替尼等药物药敏或耐药相关突变，为临床提供全面的辅助判断。

注意事项

推荐样品类型顺序：
新鲜病变组织＞冰冻病理切片＞石蜡包埋病理组织或切片＞其它类型标本。

注意：为了保证检测的准确性和提高检测的灵敏度，检测所用的DNA质量非常重要。采集的肿瘤组织经常会包含正常的组织细胞，不同类型的肿瘤样品中正常细胞所占的比例不一样，而福尔马林固定的石蜡切片更会影响到提取DNA的质量和纯度。

临床应用

指导抗EGFR单抗类药物的合理使用

筛查出对导抗EGFR单抗类药物药物敏感的患者，制定出最适合患者的肿瘤治疗方案

监督治疗，节省医疗资源

B-RAF突变与肺癌患者和结直肠癌患者EGFR靶向治疗的耐药性密切相关，检测B-RAF突变
可及时发现耐药，辅助临床调整治疗方案，避免资源浪费

品牌介绍

透景生命，专注于多重检测流式荧光技术应用

上海透景生命科技股份有限公司（透景生命）成立于2003年，专业从事高端体外诊断产品研发、生产和推广。2017年成功上市。

透景生命立足于自主创新，构建了高通量流式荧光杂交技术平台、高通量流式免疫荧光技术平台、多重荧光PCR技术平台、化学发光免疫分析技术平台等多个技术平台。

透景生命已累计获得100余项医疗器械注册证书，目前已收到117个II类和III类注册证。产品包括20种肿瘤标志物（全自动流式荧光平台），并开创性的打破进口免疫试剂的仪器封闭，研发出可兼容进口平台的肿瘤标志物试剂；基于流式荧光的HPV27全分型产品；全自动自免十五项试剂给临床提供更高速便捷体验，以及全球专利产品双基因甲基化检测试剂盒（发明专利专利证号ZL201510203539.1），可用于肺癌早期辅助诊断等创新型产品。

人K-ras基因7种突变检测试剂盒（PCR荧光法）

规格：24人份/盒

组分及储存有效期

24人份：

序号	名称	包装	体积	描述
1	突变位点PCR反应液	7管	550µl	PCR反应组分，扩增引物，标记探针，内标
2	外标PCR反应液	1管	550µl	PCR反应组分，扩增引物，标记探针，内标
3	DNA 聚合酶	2管	30µl	热启动DNA 聚合酶
4	阳性质控品	1管	80µl	含7种KRAS突变类型的DNA片段
5	阴性质控品	1管	300µl	野生型正常人基因组
试剂盒在-20℃及以下避光冷冻存放，试剂盒有效期为9个月。试剂反复冻融5次有效。开瓶(2～8℃)7天有效，运输4天内有效。

样本类型

为了保证检测的准确性和提高检测的灵敏度，检测所用的DNA质量非常重要。采集的肿瘤组织经常会包含正常的组织细胞，不同类型的肿瘤样品中正常细胞所占的比例不一样，而福尔马林固定的石蜡切片更会影响到提取DNA的质量和纯度。
1.   推荐样品类型顺序：新鲜病变组织＞冰冻病理切片＞石蜡包埋病理组织或切片＞其它类型标本。
2.   推荐使用商业化的DNA提取试剂盒，所提取的DNA OD260/OD280在1.6-2.0。提取的DNA立即用于检测，或保存于-20℃，保存时间不要超过6个月。
3.   从新鲜病变组织中取样应确定含有肿瘤病变组织。
4.   石蜡包埋病理组织或切片应确定含有肿瘤病变组织。
5.   所用石蜡包埋病理组织或切片保存时间不超过3年。

适用仪器

	荧光PCR仪
1	ABI-7500 Real-time PCR detection system
2	LightCycler® 480 Real-Time PCR System

CFDA注册证书

国械注准20163401342

操作流程

透景人KRAS基因突变检测试剂盒-操作流程四图合一

性能指标

灵敏度	各突变位点最低检测限均优于1%。
特异性	特异性参考品符合率： a) 采用无相应靶突变序列的野生型人基因组参考品进行测定，结果各突变位点均为阴性且内标Ct值小于35。 b) 检测范围外的8种突变参考品进行测定，结果各突变位点均为阴性且内标Ct值小于35。 c) 非人类基因组（金黄色葡萄球菌）进行测定，结果各突变位点均为阴性且内标Ct值小于35。
重复性	采用经标化的企业参考品，7种突变位点（Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ala、Gly12Arg、Gly12Ser）混合参考品浓度水平为50%进行10次平行检测，结果应为阳性且Ct值的变异系数（CV,%）≤5%。