Y染色体微缺失分子诊断试剂(Y6)
研究表明,Y染色体上的精子生成因子(azoospermia factor,AZF)座位微缺失是男性原发性不育的一个重要遗传因素。AZF基因家族有AZFa、AZFb、AZFc三个区域,其中任何一个区域的微缺失都能导致精子生成障碍。本试剂盒根据欧洲生殖协会推荐标准进行设计,运用多重 PCR技术快速检测Y染色体AZF基因家族AZFa、AZFb、AZFc三个区域中的6个序列标签位点(sequence tagged sites, STS)微缺失。每个样品需做A组和B组两个多重PCR反应,A组包括sY254、sY127、sY86三个位点,B组包括sY134、sY84、sY255三个位点。另外,每组设置一对扩增SRY基因(位于Y染色体短臂上的性别决定基因)的引物,作为内对照。
Y染色体微缺失分子诊断试剂(Y6)STS位点模式图

透景Y6完全符合欧洲生殖协会(EAA)2004版指导原则和EMQN标准
STS sY84 sY86 sY127 sY34 sY254 sY255
EAA √ √ √ √ √ √
Tellgen Y6 √ √ √ √ √ √
实验前准备
1. PCR扩增前,请先抽提标本DNA,抽提方法由各实验室根据习惯决定。最终将DNA用TE稀释成浓度约为50-100ng/ul。
2. PCR扩增期间,请准备好3.0%琼脂糖凝胶备用。
操作步骤
1. PCR扩增
2. 电泳检测
结果分析
所有男性标本都应扩增出内对照条带。若待测样品中无此条带,提示实验失败,应检查DNA抽提是否成功,或扩增操作是否正确。
如果与正常对照相比出现一个或多个STS条带丢失,即可判断为其对应的STS缺失。
示例图片
注: 泳道1为A组正常对照 泳道2为样品sY254缺失
泳道3为样品sY127缺失 泳道4为空白对照
泳道5为B组正常对照 泳道6为样品sY255缺失
泳道7为样品sY134缺失 泳道8为Marker
特别提示
请严格按照PCR实验室相关防止交叉污染的规定进行操作,特别是防止扩增前和扩增后的物品、区域等交叉混用。
常见问题分析
1.PCR扩增没有目的产物,可能原因
(1) 试剂已经失效或被污染;
(2) PCR操作过程失误;
(3) 提取的标本DNA浓度比较低,最适浓度为50-100ng/ul。
2. PCR扩增有非特异产物,可能原因
(1) 使用的PCR仪与本说明书提供扩增程序不配套;
(2) 试剂移液枪或实验室有污染;
(3) 加入的模板DNA量过多。
若出现问题不能解决,请与本公司售后服务工程师及时联系。
订货信息
货号/规格 | 产品 | 项目 |
PG020012/20T | Y染色体微缺失分子诊断试剂(6个位点) | sY84、sY86、sY127、sY134、sY254、sY255 |