α地中海贫血3GPCR检测试剂盒

检测原理

    α－地中海贫血（简称α－地贫）是由于α－珠蛋白基因簇缺陷导致α珠蛋白肽链表达失衡而产生的单基因遗传病，主要为大片段缺失，也有部分点突变，是我国华南地区最常见、危害性最大的遗传病之一。在我国人群中常见的基因突变类型有缺失型－α3.7，－α4.2和- -SEA以及点突变Hb Constant Spring/Hb Quong Sze等，本试剂盒根据Gap－PCR原理设计特异性引物，选择性扩增－α4.2，－α3.7 --SEA和正常区域，对应PCR产物目的条带分别为2.4kb，1.8kb，1.0kb和1.45kb,最后通过琼脂糖凝胶电泳检测。

用途

    用于α－地中海贫血3.7、4.2、SEA基因缺失型的各种纯合或杂合基因型的检测。

操作步骤

1．PCR扩增
2．电泳检测
    电泳条带大小与对应基因型见下表：
基因型              条带（bp）      表现型
αα/αα               1450            正常
－α^3.7/αα           1800,1450       静止型
－α^4.2/αα           2400,1450       静止型
－α^3.7/－α^3.7       1800            标准型
－α^4.2/－α^4.2       2400            标准型

基因型              条带（bp）      表现型
－α^3.7/－α^4.2       1800,2400       静止型
――/αα             1000,1450       标准型
――/－α^3.7         1000,1800       血红蛋白H病
――/－α^4.2         1000,2400       血红蛋白H病
――/――           1000            Hb Bart’s胎儿水肿综合征

示例图片

             注：其中泳道1为Marker(DL2000)          泳道2为特制Marker
        泳道3为正常样本                 泳道4为3.7杂合子样本
        泳道5为3.7/SEA样本             泳道6为4.2杂合子样本
        泳道7为4.2/SEA样本             泳道8为SEA杂合子样本
        泳道9为SEA纯合子样本

注意事项

1． 在运输过程中可能会有PCR反应液附着在管壁或管盖上，使用前请离心；
2． 请严格按照PCR实验室相关防止交叉污染的规定进行操作，特别是防止扩增前和扩增后的物品、区域等交叉混用；
3． 因为每管加入的Taq酶的体积非常小，请选用精密的微量移液器；

常见问题分析

1．PCR扩增没有目的产物,可能原因
(1)试剂已经失效或被污染；
(2)PCR操作过程失误；
(3)提取的标本DNA浓度比较低，最适浓度为50－100ng/ul。

2．PCR扩增有非特异产物，可能原因
(1) 使用的PCR仪与本说明书提供扩增程序不配套；
(2) 试剂移液枪或实验室有污染；
(3) 移液器不准，加入Taq酶过多；
(4) 加入的模板DNA量过多。

3．临床生化检测提示为血红蛋白H病，但是PCR只扩增出- -SEA条带和正常条带
(1) 可能为非缺失型HbH病，建议采用本公司提供产品检测常见Hb Constant Spring和Hb Quong Sze（产品名CQ Strip）试剂盒。

若对本公司产品有任何疑问或建议，请与本公司负责售后服务的工程师及时联系。

订货信息

货号/规格	产品	项目
PG010012/20T	α地中海贫血3GPCR检测试剂盒（3个位点）	- α3.7, -α4.2, --SEA